相信經(jīng)常在實(shí)驗(yàn)室做色譜分析的人都會(huì)有這樣的經(jīng)驗(yàn):在絕大多數(shù)情況下,如果建立一個(gè)新的色譜方法(例如擴(kuò)項(xiàng)),色譜圖往往不會(huì)“一帆風(fēng)順",總會(huì)出現(xiàn)一些奇奇怪怪的狀況——要么沒有保留,要么分離度不夠,要么峰形難看,要么響應(yīng)很差等等。
對(duì)于這種問題,我們要像老中醫(yī)一樣,望聞問切,對(duì)癥下藥。但要做到這一點(diǎn),就需要了解現(xiàn)象背后的成因。今天,作者結(jié)合自己的經(jīng)驗(yàn),來分享一下前延峰的成因。因?yàn)檫@種現(xiàn)象可以說是“一果多因",不找出對(duì)應(yīng)的成因,往往難以解決。
前延峰的特點(diǎn)是峰的前沿平緩,后沿陡峭,看起來像被向前“拉扯",有時(shí)也會(huì)在前面出現(xiàn)“小包"。



2. 溶劑效應(yīng)
溶劑洗脫強(qiáng)度過強(qiáng),也是導(dǎo)致前延峰的重要原因。
例如初始流動(dòng)相水相比例較高,而定容液為純甲醇或乙腈時(shí),在進(jìn)樣過程中,由于樣品溶劑洗脫能力更強(qiáng),樣品液滴前端的分子會(huì)被優(yōu)先洗脫,幾乎不被保留,因而“跑得更快"。
當(dāng)強(qiáng)溶劑被流動(dòng)相稀釋后,保留能力恢復(fù)正常,后續(xù)分子才被正常保留,從而形成前延峰。
這種情況通常表現(xiàn)為:主峰前出現(xiàn)一個(gè)隆起的“小包",且前延程度與定容液和初始流動(dòng)相之間的極性差異有關(guān)。
降低溶劑效應(yīng)的常見方法包括:
· 減少進(jìn)樣體積
· 降低強(qiáng)溶劑在流動(dòng)相中的比例
· 使用溶劑效應(yīng)消除器
3. 色譜柱問題
當(dāng)色譜柱發(fā)生填料塌陷,或“先天性"填充不均勻時(shí),會(huì)導(dǎo)致固定相表面的活性位點(diǎn)分布不均(某些部位對(duì)樣品吸附能力變?nèi)酰?,從而產(chǎn)生非線性吸附。
當(dāng)進(jìn)樣濃度較高時(shí),這些位點(diǎn)容易達(dá)到吸附飽和。此時(shí),目標(biāo)物在該吸附位置會(huì)分為兩部分:被吸附部分和飽和部分。顯然,飽和部分會(huì)“走得更快"。
如果被吸附部分的濃度(或摩爾數(shù))大于飽和部分,則被吸附部分成為峰的主體,飽和部分形成峰前延;反之,如果被吸附部分濃度更低,則飽和部分成為峰的主體,這種情況會(huì)形成拖尾峰。針對(duì)這種情況,最直接的方法就是更換色譜柱。
